hemostasia - Recuento de Plaquetas

Recuento de Plaquetas

Introducción

Las plaquetas se originan en la medula ósea a partir del megacariocito, son redondas u ovaladas y miden de 1 a 3 micras de diámetro. Tienen una vida media de 8 a 11 días, desempeñan una función cítrica en la hemostasia que consiste en: 1) mantenimiento continúo de la integridad vascular; 2) paro inicial del sangrado por formación del tapón plaquetario; 3) estabilización del tapón hemostático por la contribución de factores plaquetarios en el proceso de formación de fibrina.

Fundamento

En una disolución con citrato de sodio azul de cresol brillante. Las plaquetas se observan a microscopio como células con un movimiento browniano. Las plaquetas se encuentran en la cámara de Neubauer utilizando también microscopia de contraste de fases después de que los eritrocitos han sedimentado en solución con oxalato de amonio al 1 %.

Objetivos

Comparar las diferencias técnicas para la cuenta de plaquetas.

Evaluar las ventajas y limitaciones de cada una de ellas.

Material:

Hamatimetro: cámara de Neubauer

Pipeta de thoma para glóbulos rojos

Tubo con anticoagulante

Liquido de dilución oxalato de amonio al 1 %

Caja de petri con papel filtro dentro

Microscopio

Gradilla

Boquilla

Equipo de vacutainer.

Técnica:

se utiliza de preferencia sangre venosa
con una pipeta de thoma para glóbulos rojos, se aspira sangre hasta la marca 1.0.
limpiar cuidadosamente la sangre adherida al exterior de la pipeta.
completar el volumen hasta la marca de 101 con el liquido diluyente de plaquetas o con oxalato de amonio al 1 % (según el método a emplear) dilución 1:100,
mezclar el diluyente y la sangre por agitación durante 3 a 5 minutos.
descartar las primeras 4-5 gotas de la pipeta y cargar la cámara de Neubauer.
se llenaran los dos lados de una cámara de Neubauer y se deja sedimentar durante 15 minutos en una caja de petri cuyo fondo esta ocupado por un disco húmedo de papel filtro y sobre este unos soportes de madera. (la preparación no debe dejarse mucho tiempo en la pipeta antes de llevarse a la cámara de recuento).
al finalizar este periodo, realizar la cuenta de plaquetas con el objetivo de 40x. Debe trabajarse con una buena iluminación con el microscopio para evitar confundir las plaquetas con lavaduras, colorante precipitado. En la cámara las plaquetas aparecen como cuerpos refractiles ovales o alongados.
contar todos los cuadros del cuadro central (para los glóbulos rojos) que tienen un superficie de 1 mm2.
esta preterminación debe hacerse rápidamente para evitar que las plaquetas se aglomeren.

Cálculos:

El número de plaquetas se multiplica por 1000 para dar la cifra por mm3 de sangre.

Numero de plaquetas / mm3 = N x 10 x 100

= N x 1000

N = Numero de plaquetas contadas

10 = corrección por la altura de la cámara.

100 = factor de dilución.

Valores de referencia:

150,000 – 450,000 plaquetas /mm3