Tiempo de Tromboplastina Parcail activada (TPT)
Introducción
Es un estudio sobre el efecto del factor antihemofílico en las prueba de coagulación de una fase, longdel, wegner y brinkhous (1953) demostraron que había dos tipos de actividad tomboplastinica y confirmaron la observación de Mills (1926) de que los preparados de cafelina cruda no coagulan el plasma hemofilico como en el plasma normal.
Cuando las tromboplastinas histicas activas fueron diluidas ofraccionadas, tenían estos preparados una actividad semejante ala de la cafelina cruda. Basándose en estos hallazgos, los preparados de tromboplastina pueden describirse como completos o parciales. Las tromboplastinas completas son capaces de producir una coagulación tan rápida en el plasma hemofílico como en el normal, mientras que con la parcial en el plasma hemofílico coagula menos rápidamente que en el plasma normal.
Fundamento
En el tiempo d trombo plastina parcial mide la actividad extrínseca de la coagulación del plasma. El tiempo requerido para que el plasma recalcificado coagule después de la incubación con fosfolípidos plaquetarios (cafalina) y un activador (caolin) del factor del contacto, es una medida de intensidad con la cual se forma la trombina a través de la vía intrínseca de la coagulación.
Esta prueba mide los factores VII, IX, XII, II, V, X, y la conversión de fibrinógeno a fibrina.
Objetivos
Analizar el mecanismo de acción de la tromboplastina parcial dentro del fenómeno de la coagulación.
Familiarizarse con las precauciones que requieren esta técnica y todas las de la coagulación.
Pipeta sexológica de 0.1 ml
Pipeta sexológica de 1 ml
Pipeta Pasteur con bulbo
Gradilla
Equipo vacutainer
Torundas y torniquete
Cronometro.
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Cloruro de calcio .025 M
Plasma problema citrato
Sustituto de plaquetas
Activad.
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TECNICA:
- el plasma de deberá separarse inmediatamente del paquete de eritrocitos y ser colocado en refrigeración.
- se añade 0.1 ml de tromboplastina parcial liquida activada a un tubo de ensayo y se encuba a 37 oC durante 2 minutos.
- transcurrido los dos minutos, agregar 0.1 ml de plasma, se mezcla perfectamente e incubar a 37 0C durante 2 minutos.
- agrega 0.1 ml del reactivo de CaCl2 0.02M (que se encuentra también en la misma temperatura) y simultáneamente se pone en marcha el cronometro. incubar, a los 20 segundos observar cuidadosamente el tubo de la prueba, haciendo resbalar el contenido por pared, hasta la aparición de los primeros hilos de fibrina. En este momento detener el funcionamiento del cronometro. La observación debe hacerse con mucha rapidez metiendo y sacando el tubo del baño del agua.
- se inclina el tubo buscando el punto final o se puede usar el asa de platino. El Punto final consiste en la aparición de los filamentos de fibrina.
- se repite la operación con el plasma problema
- es aconsejable realizar las pruebas por duplicado
Resultados
La prolongación anormal indica deficiencias intrínsecas de un factor o presencia de un inhibidor. Solo el factor VII no esta incluido en el tiempo de tromboplastina parcial. Detecta deficiencias importantes de los factores VII, IX, XI, XII o presencia de inhibidores) anticoagulantes circulantes) como la heparina, anticuerpos dirigidos contra el factor VII o IX.
Valores de referencia
Tiempo de tromboplastina parcial: 40+ - 3 segundos